Tema. - Selección y validación de genes de
referencia para estudios de expresión génica en Klebsiella pneumoniae mediante
PCR cuantitativa en tiempo real de transcripción inversa
Objetivos. - Evaluar el perfil de expresión de
once genes candidatos de referencia en células de K.pneumoniae sometidas a
diversas condiciones experimentales
Tipo de muestra biológica. - Células de K.
pneumoniae cultivadas en medio LB y recolectadas en la fase exponencial
Tipo de ácido nucleico a ser extraído. - ARN
Gen o secuencia a amplificar. - recA, rho, proC
y rpoD
Tipo de PCR. - PCR cuantitativa en tiempo real
de transcripción inversa. Los cebadores se diseñaron utilizando Primer3 v.
0.4.0 66 de acuerdo con los siguientes parámetros: longitud del cebador de
aproximadamente 20 bases, contenido de GC de 45 a 60%, temperatura de fusión
(valor de Tm) de 60 ° C y tamaño de amplicón de 95 a 105 pares de bases.
Visualización. - Electroforesis
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